是否为危控品： 否生产企业：伊莱瑞特 密度：纯度：大于98%储存条件：2-8
该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组TSH浓度
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠TSH抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠TSH会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠TSH抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠TSH抗体与结合在包被抗体上的小鼠TSH结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，TSH浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中TSH的浓度。
| 反应类型 | 夹心法 |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 4.5h |
| 反应性 | 小鼠 |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 1.25—80 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.75 ng/mL |
| 样本体积 | 100μL |
| 样本类型 | 血清、血浆或其他相关生物液体 |
可检测样本中的小鼠TSH，且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
板内，板间变异系数均<10%。
由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 80 | 2.31 2.314 |
2.312 | 2.239 |
| 40 | 1.662 1.662 |
1.662 | 1.589 |
| 20 | 0.875 0.875 |
0.875 | 0.802 |
| 10 | 0.479 0.503 |
0.491 | 0.418 |
| 5 | 0.259 0.249 |
0.254 | 0.181 |
| 2.5 | 0.174 0.17 |
0.172 | 0.099 |
| 1.25 | 0.118 0.13 |
0.124 | 0.051 |
| 0 | 0.071 0.075 |
0.073 | -- |
 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (ng/mL) |
4.40 | 7.30 | 36.90 | 4.40 | 7.10 | 39.00 |
| Standard deviation |
0.30 | 0.30 | 1.70 | 0.30 | 0.40 | 1.20 |
| C V (%) | 6.82 | 4.11 | 4.61 | 6.82 | 5.63 | 3.08 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=5) | 88-98 | 93 |
| EDTA plasma (n=5) | 95-107 | 100 |
| Cell culture media (n=5) | 91-106 | 99 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 89-103 | 94-110 | 95-108 |
| Average (%) | 96 | 101 | 103 | |
| 1:4 | Range (%) | 102-117 | 81-92 | 93-108 |
| Average (%) | 107 | 87 | 100 | |
| 1:8 | Range (%) | 96-110 | 82-96 | 96-109 |
| Average (%) | 103 | 89 | 101 | |
| 1:16 | Range (%) | 98-112 | 83-95 | 95-107 |
| Average (%) | 106 | 90 | 100 |
未拆封的试剂盒可在4℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
| 中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃，可存放6个月 |
| 冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6个月 |
| 标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 4℃.可存放6个月 |
| 生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 4℃(避光) |
| 反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 4℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
| 产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
| 质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明：所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
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1.Add 100 μL standard or sample to each well. Incubate for 90 min at 37℃. |
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2.Remove the liquid. |
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3.Add 100 μL Biotinylated Detection Ab. Incubate for 1 hour at 37℃. Aspirate and wash 3 times. |
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4.Add 100 μL HRP Conjugate. Incubate for 30 min at 37℃. Aspirate and wash 5 times. |
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5.Add 90 μL of Substrate Reagent. Incubate for 15 min at 37℃. |
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6.Add 50 μL Stop Solution. |
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7.Read at 450 nm immediately. Calculation of results. |
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